郭建新,袁光波,陈 蜜.SGC-7901/DDP胃癌细胞中MDR1 miRNA干扰载体构建及靶点筛选[J].肿瘤学杂志,2012,18(7):520-523. |
SGC-7901/DDP胃癌细胞中MDR1 miRNA干扰载体构建及靶点筛选 |
Construction of Interfering Vectors for MDR1 MiRNA in SGC-7901/DDP Gastric Cancer Cell and Screening for Target Spots |
投稿时间:2012-02-06 |
DOI: |
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中文关键词: SGC-7901/DDP胃癌细胞 多药耐药基因 miRNA 实时定量基因扩增 荧光检测系统 |
英文关键词: |
基金项目:浙江省宁波市鄞州区农业与社会发展科技项目(鄞科2009-61) |
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中文摘要: |
摘 要:[目的] 筛选胃癌细胞多药耐药基因1(MDR1)的有效RNA干扰靶点,并进行药物敏感度验证。[方法] 设计并合成3条干扰靶点Oligo序列,连接入线性化的pcDNA6.2 GW/EmGFP-miR载体中,瞬时转染SGC-7901/DDP胃癌细胞,通过qPCR相对定量法筛选出最佳干扰序列,将最佳干扰质粒转染细胞后,采用CCK-8试剂盒进行药物敏感度检测。[结果] 通过qPCR筛选出相比阴性对照组干扰效果最佳的RNA干扰(RNAi)序列,MDR1的mRNA表达水平抑制了25%±1%。MDR1经RNA干扰后,药物敏感度实验表明耐药细胞株对顺铂的敏感度增强,IC50值相比空白对照组和阴性对照组分别下降0.4μg/ml、0.5μg/ml。[结论] 成功筛选出一个MDR1的RNA干扰靶点,MDR1经RNA有效干扰后,耐药细胞株对顺铂的敏感性增强。 |
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